酶联免疫检测试剂盒具有快速、敏感、简便、易于标准化等优点,使其得到迅速的发展和广泛应用。尽管早期的试剂盒由于特异性不够高而妨碍了其在实际中应用的步伐,但随着方法的不断改进、材料的不断更新,尤其是采用基因工程方法制备包被抗原,采用针对某一抗原表位的单克隆抗体进行阻断酶联免疫检测试剂盒试验,都大大提高了试剂盒的特异性,加之电脑化程度较高的检测仪的使用,使酶联免疫检测试剂盒更为简便实用和标准化,从而使其成为较广泛应用的检测方法之一。
检测原理:
本试剂盒是利用竞争ELISA方法,在酶标板微孔上预包被抗莱克多巴胺抗原。检测时,加入标准品或样品溶液,莱克多巴胺抗体及酶标记物,包被抗原和加入样本中的莱克多巴胺竞争性地与莱克多巴胺抗体结合后,再与酶标记物形成抗原抗体复合物,用TMB底物显色;加入反应终止液,在450nm波长酶标仪下进行检测,样品中的莱克多巴胺浓度与吸收光强度成反比。
酶联免疫检测试剂盒在实验时有以下八大忌讳:
1、从冷躲环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可运用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装进密封袋中保存。
2、浓洗涤液或许会有结晶分出,酶联免疫检测试剂盒稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3、各步加样均应运用加样器,并常常校对其正确性,以避免试验误差。一次加样时刻控制在5分钟内,如标本数目多,引荐运用排枪加样。
4、如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于规范品孔孔的OD值),请先将样本稀释必定倍数(n倍)后再测定,核算时请zui后乘以稀释倍数(×5×n)。
5、封板膜只限一次性运用,以避免穿插污染。
6、本试剂不同批号组分不得混用。显色剂B请避光保存。
7、严格依照说明书的操作进行,ELISA试剂盒试验结果断定必须以酶标仪读数为准。
8、酶联免疫检测试剂盒所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。