分享！鱼elisa试剂盒操作技术相关的注意事项

更新时间：2022-09-27

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　　鱼elisa试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并*洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

　　鱼elisa试剂盒操作技术相关的注意事项：

　　1、严格按照鱼elisa试剂盒说明书进行操作。操作前将试剂在室温下平衡30～60min。

　　2、加样后及时放人孵箱。标本较多时，要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间，防止孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。

　　3、封板温育时，各孔一定要封严，防止阳性标本的液体蒸发，产生周边现象从而导致“花板”的出现。

　　4、用洗板机洗板时，保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干：还要防止针口有纤维蛋白或异物，这些异物在洗板的过程中易产生拖带现象而导致“花板”的出现。

　　5、合理安排检测量，以免反应板过多造成洗板等待时间长。

　　6、加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。

　　7、显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用。

　　8、加样时保持显色剂不外流；A、B液应避免接触金属器械。加终止液时应避免产生气泡。

　　9、应保证C清洁，整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸。以上的措施可以使“花板”降至限度。从而提高检测的特异性。并得到更准确、可靠的实验结果。